1、食品**問題主要有害污染物:（1）農(nóng)藥,化肥:有機(jī)磷,有機(jī)氯，硝酸鹽（2）獸藥：興奮劑，**劑，***（3）重金屬離子：鎘，鉛，汞，鉻，砷，鉬（4）生物**：黃曲霉**，嘔吐**，肉**（5）致病菌：大腸桿菌，沙門氏菌，葡萄球菌。

2、快速檢測(cè)：包括樣品制備在內(nèi)，能夠在短時(shí)間內(nèi)出據(jù)檢測(cè)結(jié)果的行為稱之為快速檢測(cè).三方面體現(xiàn)（1）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備要簡(jiǎn)化（2）樣品經(jīng)簡(jiǎn)單前處理后即可測(cè)試，后采用**快速的樣品處理方式（3）分析方法簡(jiǎn)單，快速，準(zhǔn)確。

3、食品**快速檢測(cè)分類:1.按分析地點(diǎn)：現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室快速檢測(cè)2.按定性定量：定性快速篩選檢驗(yàn)，半定量檢驗(yàn)，全量檢驗(yàn)。

4、農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法:(一)生物法：（1）生物化學(xué)測(cè)定法(酶抑制率法，速測(cè)卡法)（2）分子生物學(xué)方法(如：ELISA)（3）活體生物測(cè)定法(發(fā)光**，大型水藻，家蠅)（4）生物傳感器法(二)化學(xué)方法酶抑制法酶聯(lián)**檢測(cè)法。

5、**定義：機(jī)體識(shí)別自身非自身，并**非自身大分子物質(zhì)，從而保持機(jī)體內(nèi)外環(huán)境平衡的一種生理反應(yīng)。

6、**基本特征：識(shí)別自身和非自身，特異性，**記憶。

7、**的基本功能：抵抗感染，自身穩(wěn)定，**監(jiān)視。

8、抗原定義：能刺激機(jī)體產(chǎn)生**答應(yīng)，并且能與答應(yīng)物(抗體或效應(yīng)性**細(xì)胞)特異性結(jié)合的物質(zhì)，稱為抗原(Antigen，Ag)

9、抗原具有抗原性：**原性，反應(yīng)原性

10、抗原分類(按抗原性質(zhì))：完全抗原，半抗原(某些**)。

11、抗原表位，又稱抗原決定簇:是位于抗原物質(zhì)分子表面或者其他部位的具有一定組成和結(jié)構(gòu)的特殊化學(xué)基團(tuán)。

12、抗體：有抗原刺激動(dòng)物的**系統(tǒng)后，由**系統(tǒng)B細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生，分泌的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有**功能的球蛋白。并非所有的**球蛋白都是抗體。

13、抗體基本結(jié)構(gòu)：a.重鏈H 2條輕鏈L 2條b.恒定區(qū)C區(qū)可變區(qū)V區(qū)c.鉸鏈區(qū)d.Fab抗原結(jié)合片段Fc：可結(jié)晶片段。

14、ELISA的原理：（1）抗原或抗體能以物理性吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其**學(xué)活性;（2）抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其**學(xué)和酶學(xué)活性;（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有**反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)準(zhǔn)中相應(yīng)抗原或抗體的量成一定比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

15、ESISA的類型:（1）雙抗夾心法(測(cè)微生物)（2）間接法測(cè)抗體（3）競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原(化肥農(nóng)藥)。

16、雙抗體夾心法基本原理:利用連接于固相載體上的抗體和酶標(biāo)抗體分別與樣品中被檢測(cè)抗原分子上兩個(gè)抗原決定簇結(jié)合，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體**復(fù)合物，由于反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標(biāo)抗體的量相對(duì)于待測(cè)抗原是過量的，因此復(fù)合物的形成量與待測(cè)抗原的含量成正比(在方法可檢測(cè)范圈內(nèi)),測(cè)定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)量(OD值)，即可確定待測(cè)抗原含量。

17、間接法測(cè)抗體基本原理:將抗原連接到固相載體上，樣品中待測(cè)抗體與之結(jié)合成固相抗原-受檢抗體復(fù)合物，再用酶標(biāo)二抗(針對(duì)案檢抗體的抗體，如羊抗人ICG抗體)與固相**復(fù)合物中的抗體結(jié)合，形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復(fù)合物，測(cè)定加底物后的顯色程度，測(cè)定待測(cè)抗體含量。

18、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原基本原理:首先將特異性抗體吸附于固相載體表面(包被)，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液，而另一組只加酶標(biāo)記抗原，標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)會(huì)(標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)含在固相上的酶抗原愈少，*后的顯色也愈淺)，再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，兩組底物降解量之差，即為我們所要測(cè)定的未知抗原的量。

19、農(nóng)藥殘留生物化學(xué)測(cè)定方法：（1）農(nóng)藥速測(cè)卡法（2）農(nóng)藥殘留分光光度法(抑制率法)。

20、速測(cè)卡法檢測(cè)原理：膽堿醋酶可催化靛酚乙酸酮(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色)有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用，使催化、水解，變色的過程發(fā)生改變，由此判斷樣品中是否含有過量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。分析步驟A.提?。焊蓛舻牟藰悠?--剪碎(1CM左右見方)---取5g于帶蓋瓶中---加純凈水或緩沖溶液(l0mL)---震搖(50次)---靜置(2min以上).B.預(yù)反應(yīng)：取一片速測(cè)卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在37℃恒溫裝放置中10min.預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。C.反應(yīng)：將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)d.每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)純凈水或緩沖液的空白對(duì)照卡。

21、速測(cè)卡法結(jié)果判定：與空白對(duì)合奏阿卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果，不變藍(lán)為陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留量較高，顯淺藍(lán)色為弱陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留兩相對(duì)較低。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或空白對(duì)照卡片相同，為陰性結(jié)果。對(duì)陽性結(jié)果的樣品，可用其他分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

22、農(nóng)藥殘留分光光度計(jì)法(抑制率法)原理：一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度成正相關(guān).，正常情況下，酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定發(fā)光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有有機(jī)磷確和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

23、酶?jìng)鞲衅?/span>：它將活性物質(zhì)酶覆蓋在電極表面，酶與被測(cè)的有機(jī)物或無機(jī)物反應(yīng)，形成一種能被電極響應(yīng)的物質(zhì)。

24、生物傳感器在食品分析中的應(yīng)用：（1）食品成分分析（2）食品添加劑的分析（3）農(nóng)藥和***殘留量分析（4）微生物和生物**的檢驗(yàn)（5）食品限度的檢驗(yàn)。

25、蔬菜中硝酸鹽含量的快速測(cè)定原理：將NO3-還原N02-后，芳香胺與亞硝酸根離子發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，重氮鹽再與芳香族化合物發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)，生成一種紅顏色偶氮化合物(偶氮染料)，其顏色強(qiáng)度與硝酸鹽含量呈正比，通過試紙由無色變?yōu)榧t色，變色的試紙放入基于光學(xué)傳感器原理的硝酸鹽檢測(cè)儀中比色測(cè)定硝酸鹽含量。儀器與材料：硝酸鹽試紙.快速測(cè)定儀。

26、硝酸鹽速測(cè)管（1）適用范圍：乳品、飲用水、蔬菜等食物中硝酸鹽的快速檢測(cè).（2）方法原理：按照國標(biāo)GB/T5009.33鹽酸蔡乙二胺顯色原理，在格林試劑中加入硝酸鹽轉(zhuǎn)化劑，并將其做成速測(cè)管，速測(cè)管中的試劑可將N03-還原為N02-后，再與芳香胺(氨基苯磺酸)發(fā)生重氮反應(yīng)，生成重氮鹽，重氮鹽再與芳香族化合物(A-祭胺)發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)，生成紅色偶氮化合物(又叫偶氮染料)，顏色深淺與硝酸鹽含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)色卡比對(duì)，確定硝酸鹽含量。

27、獸藥殘留定義：動(dòng)物產(chǎn)品的任何可食部分所含獸藥的母體化合物及其代謝物，以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)殘留。

28、獸藥殘留快速檢測(cè)微生物法檢測(cè)原理：檢測(cè)管中的培養(yǎng)基預(yù)先接種了嗜熱脂肪芽孢桿菌，并含有**生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)以及pH指示劑。只需加入100ul樣品于檢測(cè)管中。將含有樣品的檢測(cè)管放入64±1℃水浴中加熱一段時(shí)間。奶或奶制品在培養(yǎng)基中迅速擴(kuò)散，若該樣品中不含有***(或者***低于檢測(cè)值)，嗜熱脂肪芽孢桿菌將在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，葡萄糖唄分解后所產(chǎn)生的酸會(huì)改變Ph指示劑顏色，由紫色變?yōu)辄S色。相反若高于檢測(cè)限的抑菌劑，則嗜熱脂肪芽孢桿菌不會(huì)生長(zhǎng)，指示劑顏色不變?nèi)詾樽仙?。黃色表明該樣品沒有***殘留或***殘留的含量低于試劑盒的檢測(cè)限(陰性)紫色表明該樣品中含有***殘留且濃度高于試劑盒的檢測(cè)限(陽性)如果介于黃色紫色之間，則說明該樣品可能不含***殘留或者***殘留的含量低于試劑盒的檢測(cè)限(部分陽性)。

29、膠體金概念：氯金酸在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。

30、**金標(biāo)記技術(shù)原理：膠體金顆粒表面負(fù)電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。膠體金對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面，無共價(jià)鍵形成，標(biāo)記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標(biāo)蛋白在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，在顯微鏡下可見黑褐色顆?；蛉庋劭梢娂t色或粉紅色斑點(diǎn)。

31、放射**測(cè)定法原理：放射**RIA：以標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體來測(cè)定的待檢樣品中抗原量。**放射IRMA：以過量標(biāo)記抗體與抗原非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，采用固相**吸附載體分離游離和結(jié)合標(biāo)記抗體。其他：放射受體分析RRA;放射配體結(jié)合分析RBA。

32、RRA檢測(cè)食品中***殘留的原理：1、每類***族均是在一個(gè)母環(huán)基礎(chǔ)上用不同功能團(tuán)修飾星辰特定功效的***。2、微生物細(xì)胞表面都存在著能與各種***功能基團(tuán)結(jié)合的特異受點(diǎn)。結(jié)合反應(yīng)是在標(biāo)記的靶參考物與無標(biāo)記的待測(cè)**之間競(jìng)爭(zhēng)進(jìn)行的。

33、競(jìng)爭(zhēng)性檢測(cè)原理：使用一種具有吸附所有β-內(nèi)酰胺**的特殊受體**，該**同14c標(biāo)記的特定量青霉素G一起加入牛奶樣品。牛奶樣品中的任何一直β-內(nèi)酰胺類均能和這種特殊標(biāo)記的青霉素G競(jìng)爭(zhēng)性地與**cell上的特異性受體結(jié)合。

34、毒鼠強(qiáng)快速檢測(cè)原理：毒鼠強(qiáng)可以與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)闇\紫紅色，檢出限1ug，*低檢出濃度2ug/ml濃度高時(shí)變?yōu)樯钭霞t色。

35、鼠藥氟乙酰胺的快速檢測(cè)速測(cè)管法檢測(cè)原理：氟乙酰胺與奈氏試劑反應(yīng)后會(huì)出現(xiàn)黃紅或棕色沉淀。*低檢出濃度10ug/ml。

36、敵鼠鈉鹽的快速檢測(cè)原理：敵鼠化學(xué)名為2-(二苯基乙酰胺)-2，3二氫-1，3-茚三酮，可與三氯化鐵反應(yīng)出現(xiàn)磚紅色。

37、砷的快速檢測(cè)原理：三氧化二砷與鋅粒和酸產(chǎn)生的新形態(tài)氫生成AsH3，其與氯化金相遇產(chǎn)生反應(yīng)，可使氯化金硅膠柱變成紫紅或灰紫色，在裝有氯化金硅膠的柱中砷含量與變色的長(zhǎng)度成正比，以次可達(dá)到半定量的目的。

38、砷銻鉍汞銀化物的快速檢測(cè)方法‘雷因須氏法’。

39、亞硝酸鹽的快速檢測(cè)方法原理：按國標(biāo)鹽酸萘乙二胺顯色原理做成的速測(cè)管，與標(biāo)準(zhǔn)色卡對(duì)比定量。

40、酒醇儀測(cè)定甲醇的檢測(cè)原理：在20℃時(shí)，不同濃度的乙醇具有固定的折光率，當(dāng)甲醇存在時(shí)，折光率會(huì)隨著甲醇濃度的增加而降低，下降值與甲醇的含量成正比。按照這一現(xiàn)象而設(shè)計(jì)的酒醇含量速測(cè)儀，可快速顯示出樣品中酒醇含量。當(dāng)這一含量與玻璃浮計(jì)測(cè)定出的酒醇含量出現(xiàn)差異時(shí)，其差值即為甲醇含量。在20°時(shí)可直接定量，在非20°時(shí)，采用于樣品相當(dāng)濃度的乙醇對(duì)照液進(jìn)行對(duì)比定量。

41、水法水產(chǎn)品中甲醛的快速檢測(cè)原理：在堿性條件下，甲醛與簡(jiǎn)笨三酚反應(yīng)后使溶液出現(xiàn)橙紅色特征。由于此方法的靈敏程度較低，水產(chǎn)品本底存在的甲醛很難參與反應(yīng)。當(dāng)人為加入甲醛時(shí)，本方法可迅速檢測(cè)出來。

42、變質(zhì)肉類的快速檢測(cè)原理：畜禽肉變質(zhì)后或病害肉，其肉體內(nèi)的揮發(fā)性鹽基氮、ph值以及過氧化物酶都會(huì)發(fā)生改變。測(cè)試酸堿度，可初步反映出其新鮮程度;測(cè)試揮發(fā)性鹽基氮，可判斷是否新鮮或腐敗;測(cè)試過氧化物酶，可初步判斷是否是病害肉。

43、牛乳中尿素的快速檢測(cè)原理：尿素能夠阻斷萘胺試劑反應(yīng)，不會(huì)生成紫紅色物資。由此證明乳品中含有尿素成分。檢出限牛乳為濃度50mg/kg;乳粉濃度500mg/kg。

44、乳品中淀粉和麥芽湖景的快速檢測(cè)原理：麥芽糊精或淀粉與組合碘試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生棕色、紫色或棕紫色化合物。

45、乳品中pro含量的快速檢測(cè)原理：考馬斯亮藍(lán)試劑在游離狀態(tài)下呈紅色，當(dāng)他與pro結(jié)合后變成青色，其顏色深度與pro含量成正比。檢測(cè)范圍：液體樣品為0.5g-20g/100g，固體樣品為1g-40g/100g。

46、米面粉中吊白塊的快速檢測(cè)方法：甲醛二氧化硫原理：甲醛次硫酸氫鈉在食物中分解成甲醛、次硫酸氫鈉和so2.甲醛與AHMT試劑反應(yīng)生成紫色化合物，檢出限為0.05ug。

47、水溶性非食用色素的快速檢測(cè)原理：水溶性非食用色素與脫脂羊毛染色后不易去除的原理對(duì)部分水溶性非食用色素進(jìn)行檢測(cè)。

48、味精谷氨酸鈉的快速檢測(cè)原理：利用谷氨酸鈉的兩性作用，加入甲醛一固定谷氨酸鈉的堿性，使羥基顯示出酸性，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，以指示劑顯示為終點(diǎn)，得出樣品中谷氨酸鈉的含量。

49、黃曲霉**：AF是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，均為二氫呋喃環(huán)和香豆素的衍生物。目前已發(fā)現(xiàn)20多種。B1是*危險(xiǎn)的致癌物熒光特性：紫外線下B1 B2發(fā)藍(lán)色熒光G1G2發(fā)綠色熒光。

50、黃曲霉**AF的快速檢測(cè)技術(shù)：**親和柱-熒光分光光度計(jì)法和**親和柱-HPLC法(1)分析原理：**親和柱試用大劑量的黃曲霉**的單克隆抗體固化在水不溶性的載體上，然后裝柱而成。試樣中AF用一定比例的甲醇/水提取，提取液經(jīng)過過濾稀釋后，用**親和柱凈化，以甲醇將親和柱上的黃曲霉**林洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高測(cè)定靈敏度，然后用熒光分光光度計(jì)進(jìn)行定量。也可以將甲醇-黃曲霉**淋洗液的一部分加入HPLC中，對(duì)黃曲霉**B1B2G1G2分別進(jìn)行定量分析。(2)ELISA法測(cè)定黃曲霉**B1原理：將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面，洗除未吸附抗原，加入一定量抗體與待測(cè)樣品提取液的混合液，競(jìng)爭(zhēng)培養(yǎng)后，在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物，洗除多于抗體成分，然后加入酶標(biāo)記對(duì)抗球蛋白的**抗體結(jié)合物，與吸附在固體表面的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，再加入酶的底物。在酶催化下底物降解，產(chǎn)生有色物質(zhì)，通過酶標(biāo)檢測(cè)儀測(cè)出酶底物的降解量。推出被測(cè)樣品中抗原量?？贵w：抗黃曲霉**B1的特異性單克隆抗體或抗血清包被抗原：黃B1與載體蛋白結(jié)合物酶標(biāo)二抗：羊抗鼠IgG與辣根過氧化酶結(jié)合物3.微柱篩選法：原理:樣品提取液通過由氧化鋁與硅鎂吸附劑組成的微柱層析管，雜質(zhì)被氧化鋁吸附，黃曲霉**被硅鎂吸附劑吸附，在波長(zhǎng)365nm紫外燈下顯示藍(lán)紫色熒光環(huán)，其熒光強(qiáng)度與黃曲霉**在一定的濃度范圍內(nèi)成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附層未出現(xiàn)藍(lán)紫色熒光，則樣品為陰性(方法靈敏度為5~10ug/kg)。由于在微柱上不能分離黃曲霉**B1，B2，GI，G2，所以測(cè)得結(jié)果為總黃曲霉**含量。

51、****：內(nèi)**外**比較：產(chǎn)生方式：內(nèi)：**崩解后釋放外：合成分泌到菌體外化學(xué)成分：內(nèi)：脂多糖LPS外：蛋白質(zhì)。

52、間接凝集試驗(yàn)定義：將可溶性抗原或抗體吸附于一種與**無關(guān)的，適當(dāng)大小的載體微利表面，再與相應(yīng)抗體或可溶性抗原在適宜條件下相互作用經(jīng)一定時(shí)間后出現(xiàn)的肉眼可見的凝集現(xiàn)象。

53、食品中微生物快檢方法：1.基于微生物代謝特征的檢測(cè)方法;2、改良培養(yǎng)基法;3、**直接計(jì)數(shù)法;4、**學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)5、分子生物學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)6、自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)7、生物傳感器檢測(cè)技術(shù)。

54、ATP生物發(fā)光法檢測(cè)原理：熒光素+ATP+O2(上：Mg2+)—→(下：熒光素酶)氧化型熒光素+AMP+PPI+H20。

55、阻抗測(cè)定法原理：當(dāng)培養(yǎng)基中因微生物的代謝活動(dòng)而發(fā)生化學(xué)改變時(shí)，阻抗也隨著改變。

56、溶氧——電流法檢測(cè)原理：應(yīng)用的是氧氣電極法的原理。在測(cè)量開始時(shí)氧氣溶解在培養(yǎng)基中，隨著**的生長(zhǎng)和繁殖，這些溶解氧不斷被消耗。DOX系統(tǒng)通過檢測(cè)與溶解氧量成比例的電流值來計(jì)算所含菌落總數(shù)，大腸菌群值。

57、微量量熱法：是利用**生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生熱量的原理設(shè)計(jì)而成，微生物在生長(zhǎng)和代謝的過程中，能產(chǎn)生大量的代謝熱。由于各種微生物的代謝產(chǎn)物熱效應(yīng)不同，因此可顯示出特異性的熱效應(yīng)曲線圖。在**生長(zhǎng)過程中，用微量量熱計(jì)測(cè)量產(chǎn)熱量等熱數(shù)據(jù)，經(jīng)過計(jì)算機(jī)處理，繪制出以產(chǎn)熱量對(duì)比時(shí)間組成的熱曲線圖，以此推斷**存在的數(shù)量。

58、放射測(cè)量法：利用**在代謝碳水化合物時(shí)產(chǎn)生CO2的原理，把微量的放射性標(biāo)記引入葡萄糖或者其他糖分子中。**生長(zhǎng)時(shí)，糖被利用并放出標(biāo)記的CO2，將生成的放射性CO2從培養(yǎng)裝置中導(dǎo)出，利用專用的測(cè)量?jī)x來測(cè)定CO2量，放射量與**數(shù)成正比。

59、快速測(cè)試片法原理：由上下兩層組成，上層的薄膜上通過粘合劑結(jié)合了指示劑，并涂覆了冷水可溶性凝膠，下層的紙片上涂覆了改良的培養(yǎng)基，并印有方格以便于計(jì)數(shù)。它是一種與限制備好的培養(yǎng)基系統(tǒng)，以每系統(tǒng)1ML的加樣量將樣品直接加到薄膜中間，蓋上含有膠凝劑和指示劑的覆蓋膜，培養(yǎng)后**在雙層膜之間生產(chǎn)，其代謝產(chǎn)物與顯色物質(zhì)作用并顯色，即可直接計(jì)數(shù)。

60、顯色培養(yǎng)基：是一類利用微生物只身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測(cè)微生物的**培養(yǎng)基。這些相應(yīng)的顯示底物是由產(chǎn)色基團(tuán)和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶的作用下，游離出產(chǎn)色基團(tuán)顯示一定顏色，直接觀察菌落顏色即可對(duì)菌種作出鑒定。優(yōu)點(diǎn)：將菌株分離，鑒定結(jié)合在一起，無需對(duì)菌株進(jìn)行分離純化和進(jìn)一步生化鑒定，大大節(jié)約樣品的分析檢測(cè)時(shí)間。

61、固相細(xì)胞計(jì)數(shù)spc原理：可以在單個(gè)細(xì)胞水平對(duì)**進(jìn)行快速檢測(cè)。用特殊濾膜濾過樣品后，存留在濾膜上的微生物用熒光素進(jìn)行熒光染色，用落射熒光顯微鏡對(duì)每個(gè)螢光點(diǎn)進(jìn)行直觀地檢測(cè)尤其對(duì)生長(zhǎng)緩慢的微生物，檢測(cè)用時(shí)短，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)法。

62、流式細(xì)胞儀的基本原理：A2待測(cè)細(xì)胞被致成單細(xì)胞懸液，經(jīng)特異性熒光染料染色后加入樣品管中，在氣體壓力下進(jìn)入流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室B2流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液，鞘液和細(xì)胞懸液組成的細(xì)胞液注一起自流動(dòng)室噴嘴口噴射出來，進(jìn)入測(cè)量區(qū)，與水平方向的激光光束垂直相交。C2被熒光染料染色的cell受到激烈激光照射后熒光，同時(shí)產(chǎn)生散射光，熒光強(qiáng)度和被測(cè)cell中cell成分與熒光燃料的結(jié)合程度有關(guān)，散射光強(qiáng)度一般與cell大小成正比，D2將cell發(fā)出的熒光信號(hào)和散射光新號(hào)通過熒光光電倍增管接受，積分放大反轉(zhuǎn)化為電子信號(hào)輸入電子接收儀，通過計(jì)算機(jī)將數(shù)據(jù)計(jì)算出來。多參數(shù)分析實(shí)現(xiàn)cell的定量分析，估計(jì)微生物大小形狀和數(shù)量。

63、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR：

(2)PCR過程：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至95℃左右一定時(shí)間后，DNA雙鏈被解離為單鏈并游離于溶液中的過程;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：人工合成的一對(duì)引物在適合的溫度下(通常50-65℃)分別與模板DNA需要擴(kuò)增區(qū)域的兩翼進(jìn)行準(zhǔn)確配對(duì)結(jié)合的過程;③引物的延伸:在適當(dāng)?shù)臏囟认?通常70~75℃),以三磷酸脫氧核糖核苷(dNTP)為反應(yīng)原料,DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，單鏈核苷酸從引物的3’末端摻入,沿靶序列模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板.每完成一個(gè)循環(huán)需2一4分鐘，在一個(gè)由計(jì)算機(jī)控制的循環(huán)加熱器上經(jīng)過三十個(gè)循環(huán)，就可以把原來的樣品**地?cái)U(kuò)增了2的30次方倍.PCR特點(diǎn):快速,準(zhǔn)確,**檢測(cè)病原體。